在微生物學(xué)研究和實際應(yīng)用中,準確計數(shù)微生物數(shù)量至關(guān)重要,菌落總數(shù)儀中的比濁法為這一需求提供了有效的解決方案。
比濁法的原理基于微生物在生長繁殖過程中會使培養(yǎng)液的混濁度發(fā)生變化。當微生物在適宜的條件下生長時,它們會消耗培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì),進行新陳代謝,同時合成自身的細胞物質(zhì)。隨著細胞數(shù)量的增加,培養(yǎng)液中的溶質(zhì)粒子濃度也相應(yīng)提高,導(dǎo)致光通過培養(yǎng)液時發(fā)生散射和吸收的程度增加,從而使培養(yǎng)液呈現(xiàn)出不同程度的混濁。
菌落總數(shù)儀利用這種光散射和吸收的特性來實現(xiàn)對微生物的計數(shù)。儀器通常包含一個光源和一套光檢測系統(tǒng)。光源發(fā)出的光線穿過含有微生物的培養(yǎng)液,光線在穿過過程中與微生物細胞相互作用,其強度會因散射和吸收而減弱。光檢測系統(tǒng)會測量透過培養(yǎng)液的光強。
在實際操作中,為了實現(xiàn)準確的計數(shù),需要進行一些前期的校準和準備工作。首先,需要使用已知濃度的標準微生物懸液來建立標準曲線。通過測量不同濃度標準懸液的光密度值,并與對應(yīng)的微生物數(shù)量進行對應(yīng)關(guān)系擬合,得到一條標準曲線。然后,將待測樣品處理成一定體積的懸液,測定其光密度值,再根據(jù)標準曲線反推出樣品中微生物的數(shù)量。

比濁法在實現(xiàn)微生物準確計數(shù)上還具有快速、簡便的優(yōu)勢,能大大提高微生物計數(shù)的效率,為微生物學(xué)研究和相關(guān)領(lǐng)域的檢測工作提供了有力支持。